正文答案与解析 第一单元 生物技术与生物工程 第一章 基因工程和蛋白质工程 第一节 基因工程的原理 随堂练习巩固 1.C 解析:酶具有多种性质,其中专一性是指一种酶只能催化一种或一类化合物的化学反应。一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子,这显然和酶的专一性相吻合。 2.A 解析:构建抗除草剂的烟草要用限制性内切酶切割杂草中含抗除草剂基因的DNA与载体。 3.B 解析:细菌或真菌繁殖快,可使外源基因迅速表达。病毒无独立生存繁殖的能力,动植物繁殖周期长,不能使目的基因迅速表达。 4.C 课后作业提升 1.A 解析:用同种限制性内切酶切割载体和含有目的基因的DNA片段,可以使二者产生的黏性末端通过互补碱基配对结合起来,再用DNA连接酶使两条链上的缺口之间形成磷酸二酯键,就形成一个完整的重组DNA分子。 2.C 解析:由题图不难看出该限制性内切酶识别的碱基序列是GAATTC,切点在G和A之间。切出的两个黏性末端的碱基是互补配对的。 3.A 解析:BamHⅠ产生的黏性末端是—G GATCC——CCTAG G—,BglⅡ产生的黏性末端是—A GATCT——TCTAG A—,所以产生的黏性末端是可以互补配对的。 4.C 解析NA 连接酶的作用就是把两个DNA 片段的黏性末端的缝隙“ 缝合” 起来, 即将黏性末端相邻的脱氧核苷酸相互连接形成磷酸二酯键。 5.C 6.C 7.C 8.A 9.D 解析NA 连接酶连接黏性末端时, 处理的目的基因不是一个,所以出现的DNA 有多种情况,A 、B 、C 三种情况都可能出现。 10.D 解析:用同一种限制性内切酶切割目的基因和载体露出能够互补配对的黏性末端,便于目的基因和载体的连接。还可能用其他限制性内切酶切割载体,避免载体重新连接。 11.C 解析:细菌的遗传物质是DNA,由于细菌是原核生物,没有细胞核,只有核区。裸露的DNA主要存在于核区,另外有些细菌中有质粒,质粒是小型环状闭合DNA。所以细菌的基因存在于核区和质粒中。 12.B 13.B 解析:当目的基因插入c点时,既不破坏抗氨苄青霉素基因,也没破坏抗四环素基因,所以说会出现结果①,但目的基因导入受体细胞并不一定能准确表达;如果出现②,说明目的基因插在a处;如果出现③,说明目的基因插在b处;只有整合到染色体上的外源基因的遗传才遵循孟德尔遗传规律。 14. 解析1) 用EcoRⅠ酶切出的目的基因和质粒具有相同的黏性末端 ,如果放在一起加入DNA 连接酶, 则可出现三种连接结果,即会出现目的基因自身形成的连接物、载体自身形成的连接物和重组质粒,要通过筛选、纯化才能选出符合要求的DNA 。 (2)载体自身形成的连接物能重新形成完整的tetR基因,具有抗四环素的特点,其他连接物中tetR基因被限制性内切酶破坏, 不再具有抗四环素的特点;在整个操作过程中,ampR基因保持完整,质粒自身形成的连接物和重组质粒都具有抗青霉素的特性。 (3)RNA聚合酶与相关基因的启动子结合,完成的是转录过程。 (4)将含有目的基因的DNA片段和载体用两种不同的限制性内切酶切割,使两种DNA片段自身的黏性末端不同,但含目的基因的DNA片段和载体的黏性末端又互补,这明显减少了DNA片段和载体的自身环化与串连,使外源DNA片段能正确插入载体启动子下游。 在本题中目的基因两端有 EcoRⅠ酶切点和BamHⅠ酶切点,在质粒载体上也有这两种酶的切点,所以可以用这两种酶切出非同源性互补黏性末端来阻止其他连接。 答案1) 目的基因— 载体连接物 载体— 载体连接物 目的基因—目的基因连接物 分离纯化 (2)载体—载体连接物 目的基因—载体连接物、载体—载体连接物 (3)启动子 mRNA (4)EcoRⅠ和BamHⅠ 15. 解析1) 切割前质粒为环状,不含游离的磷酸基团。切割后质粒成了一个链状的双链DNA 分子, 含两个游离的磷酸基团。 (2)因为Sma Ⅰ识别序列中均为G—C碱基对, G、C之间含三个氢键,热稳定性高。 (3)据题图可知,SmaⅠ既会破坏标记基因,也会破坏目的基因。 (4)若用同种限制性内切酶切割质粒和外源DNA中的目的基因,因为两端的黏性末端能够互补配对,会出现自身环化的情况。而用两种限制性内切酶切割,因为两端形成的黏性末端不能够互补配对,不会出现自身环化。 (5)DNA连接酶可以连接具有能互补配对的黏性末端的 DNA片段。 (6)标记基因可以鉴别受体细胞是否含有目的基因。 答案1)0 、2 (2)高 (3)SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因 (4)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 (5)DNA连接 (6)鉴别和筛选含有目的基因的细胞 第二节 基因工程的应用 随堂练习巩固 1.B 解析:在大田中种植转基因抗虫棉时间久了,有抗性的害虫数量会越来越多,且抗性程度越来越高。在大田中间隔种植少量非转基因的棉花,可以减缓害虫抗性基因突变的速率。
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