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3 结果与讨论
3.1 单因素实验
3.1.1 提取温度对葡萄皮花色苷提取的影响实验结果分析
在提取液乙醇浓度为 60%，提取液 pH 1.0 的条件下，于 30℃、40℃、50℃、60℃、70℃下提取葡萄皮中的花色苷，结果见图3-1。
图 3-1 提取温度对葡萄皮花色苷提取的影响
从图3-1可以明显看出，提取温度在 30℃- 50℃时，葡萄皮花色苷的提取率受提取温度的影响不大。当提取温度上升到 50℃以后，随着提取温度的升高，葡萄皮花色苷的提取率有着较大的提高，当提取温度达到60℃时，花色苷的提取率达到最大，温度过高会对花色苷的稳定性产生影响，因此，提取温度为60℃时的提取效果最佳。
3.1.2 乙醇浓度对葡萄皮花色苷提取的影响实验结果分析
在温度60℃，提取液 pH 1.0 的条件下，分别用乙醇浓度为 0%、20%、40%、60%、80%、95%的酸性乙醇溶液来提取葡萄皮中的花色苷，结果见图3-2。
图 3-2乙醇浓度对葡萄皮花色苷提取的影响结果
从图3-2可以明显看出，提取液的乙醇浓度在0-80%之间时，花色苷的提取率随着提取液乙醇浓度的增大而提高，当乙醇浓度达到 80%时，花色苷的提取率达到最大。提取液乙醇浓度超过 80%以后，花色苷的提取率随着乙醇浓度的升高而有所降低。因此，提取液的乙醇浓度为80%时，花色苷的提取率最高。
3.1.3 pH 对葡萄皮花色苷提取的影响实验结果分析
在温度60℃，提取液的乙醇浓度在80%条件下，分别用 pH 为 3.0、2.5、2.0、1.5、1.0、0.5 的酸性乙醇溶液提取葡萄皮的花色苷，结果见图3-3。
图 3-3 pH 对葡萄皮花色苷提取的影响结果
从图3-3可以明显看出，花色苷的提取率随着提取液 pH增大而减小，pH 值越低提取率越高，说明提取液中较强的酸性有利于葡萄皮中花色苷物质的浸出。当提取液的 pH 为0.5 时，花色苷的提取率达到最高。因此，提取液 pH 为 0.5 时的提取效果最好。
3.2 正交实验
3.2.1 正交实验的结果及分析
根据提取温度、提取液乙醇浓度、提取液 pH 等单因素试验的结果，以提取温度、乙醇浓度、pH 值三个因素作为研究对象，分别设三个水平，按 L9 (33)正交表进行正交试验，以花色苷提取液吸光值为考察指标，选出葡萄皮花色苷的最佳提取条件。见表3-1 因素水平表。
表3-1 葡萄皮花色苷提取因素水平实验表
代号
A
B
C
水平
温度℃
pH
乙醇浓度%
1
2
3
50
60
70
0.5
1.0
1.5
60
80
95
试验安排中的各个因素是随机安排的，每一行为一个试验。试验结果及分析见表3-2 L9 (33)正交试验结果及分析。
表3-2 正交试验结果及直观分析表
试验号
A
B
C
吸光值
温度
pH
乙醇浓度
1
1
1
1
0.425
2
1
1
2
0.441
3
1
1
3
0.402
4
1
2
1
0.374
5
1
2
2
0.355
6
1
2
3
0.350
7
1
3
1
0.330
8
1
3
2
0.317
9
1
3
3
0.309
10
2
1
1
0.475
11
2
1
2
0.507
12
2
1
3
0.483
13
2
2
1
0.407
14
2
2
2
0.412
15
2
2
3
0.398
16
2
3
1
0.346
17
2
3
2
0.349
18
2
3
3
0.353
19
3
1
1
0.373
20
3
1
2
0.397
21
3
1
3
0.365
22
3
2
1
0.349
23
3
2
2
0.337
24
3
2
3
0.341
25
3
3
1
0.307
26
3
3
2
0.299
27
3
3
3
0.310
K1
3.304
3.868
3.386
T=10.152
K2
3.730
3.323
3.414
K3
3.118
2.920
3.311
k1
0.367
0.430
0.376
k 2
0.414
0.369
0.379
k 3
0.346
0.324
0.368
R
0.068
0.106
0.011
表3-2中K1行的数值，即依次为KA1、KB1、KC1表示为因素A在1水平时所对应OD530值之和，即KA1= 0.425+ 0.441+ 0.402+ 0.374+ 0.355+ 0.350+ 0.330+ 0.317+ 0.309=3.304 。KB1、KC1同理。
表3-2中K2行的数值，即依次为KA2、KB2、KC2。KC2表示为因素A在2水平时所对应的OD530值之和，即KA2= 0.457+ 0.507+ 0.483+ 0.407+ 0.412+ 0.398+ 0.346+ 0.349+ 0.353=3.730。KB2、KC2同理。
表3-2中K3行的数值，即依次为KA3、KB3、KC3。KC3表示为因素C在3水平时所对应的OD530值之和，即KA3= 0.373+ 0.397+ 0.365+ 0.349+ 0.337+ 0.341+ 0.307+ 0.299+ 0.310=3.118。KB3、KC3同理。
表3-2中k1行的数值，即依次为kA1、kB1、kC1。kA1=KA1/9=3.304/9=0.367。kB1、kC1 同理，k2、k3行的数值所得的方法与k1同理。
表3-2中R行的数值，依次为RA、RB、RC。RA的数值是因素A列k的最大值减去k的最小值，即RA=kAmax－kAmin=0.414－0.346=0.068。RB、RC同理。
根据R值的大小来确定葡萄皮花色苷的提取温度、pH值、乙醇浓度这三个因素对于本试验的显著性。R值越大，则该因素显著性越大。根据表中R的值可确定以上三个因素的显著性是：B＞A＞C。
表3-2中三个因素的优水平的确定是以k值为依据。例如因素A列，k2＞k1＞k3,则因素A中2水平为优水平；又如因素B列，k1＞k2＞k3，则因素B中1水平为优水平。依次类推可得试验范围内的优水平为A2、B1、C2，即葡萄皮花色苷的提取温度为60℃、pH值为0.5、乙醇浓度为80%。
3.3 葡萄皮花色苷的稳定性研究
3.3.1 稳定剂的选取结果
取葡萄皮花色苷提取液稀释10倍，取四份样液，每份10ml，分别加入等量的0.02%的柠檬酸、L-谷氨酸、半胱氨酸、抗坏血酸溶液各10ml，在80℃的条件下恒温3h，每隔30 min取样一次，结果见图3-4。
图3-4 稳定剂的选取结果
从图3-4可以明显看出，加入稳定剂对葡萄皮花色苷的稳定性有一定效果，随着加热时间增加，吸光值不断的下降，而且可以看出柠檬酸下降的最慢，说明柠檬酸对葡萄皮花色苷的稳定性效果更好。
3.3.2 稳定剂用量的选取结果
对已选取的稳定剂进行用量试验，分别配置0.02%、0.04%、0.06%、0.08%、0.10%的柠檬酸，在80℃的条件下恒温2h，每隔30 min取样一次，结果见图3-5。
图 3-5 柠檬酸的用量测定结果
从图3-5可以明显看出，0.02%柠檬酸的葡萄皮花色苷溶液下降趋势要比对0.04%柠檬酸的葡萄皮花色苷溶液下降趋势小，由于0.06%、0.08%、0.10%柠檬酸的葡萄皮花色苷溶液出现不等量的沉淀，故0.02%柠檬酸对葡萄皮花色苷溶液的稳定性效果更好。
3.3.3 温度对葡萄皮花色苷稳定性影响实验
取一定量葡萄皮花色苷提取液，用蒸馏水稀释10倍，分别加入等量的稳定剂分别置于70℃、80℃、90℃恒温下，每30 min测定溶液中花色苷的浓度，结果见图3-6。
图 3-6温度对葡萄皮花色苷稳定性影响结果
从图3-6可以明显看出，随着温度的提高和加热时间的延长，花色苷溶液的吸光度值变化明显，趋于减小，说明花色苷的耐热性差。在加入稳定剂柠檬酸后，则可以有效地提高花色苷对热的耐受性，其吸光度值均比对照变化小。故随着温度的升高花色苷降解速度加快，稳定性逐渐下降。 |
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发表于 2018-8-23 11:54:35