2018液相色谱法检测食品中氯霉素残留的方法分析

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　　摘要：氯霉素残留不仅会威胁畜牧养殖业的生产，还会对其他以畜牧养殖业为基础的食品产业造成严重危害，对食用这些食品的人类也会产生严重的副作用。本文结合实验对液相色谱法在食品氯霉素残留检测中的应用问题进行了探讨，以期对进一步提高液相色谱在氯霉素检测中的应用水平和成效能够有所借鉴。
　　关键词：液相色谱法 氯霉素残留 检测
　　1 氯霉素的危害
　　氯霉素的本质是抗生素，长期滥用不仅不会降低病原菌的危害，反而还会导致病原菌的抗药性增强。此外，长期使用氯霉素还会在动物体内造成残留，而这会严重损害动物的生殖系统，主要表现为生育力降低、产仔数减少、流产等，进而严重威胁到畜牧养殖业的生产。一旦动物体内出现氯霉素残留，就可能随着由这些动物制成的肉制食品或其衍生物乳制品而进入人体，因为氯霉素有严重的副作用，进而对人体健康就会产生很大的危害。例如氯霉素对人体造血系统危害极大，能导致可逆性骨髓抑制和不可逆性再生障碍性贫血等疾病。又例如新生儿因服用含有氯霉素残留的乳制品后，极易引发灰婴综合征等疾病。
　　2 实验材料与方法
　　2.1 主要仪器
　　实验主要用到的仪器有：液相色谱仪(waters 600-996二极管阵列检测器)、紫外可见分光光度计(岛津 UV-2450)、超声波清洗器(DL-120B)、高速台式离心机(TDL-100)、旋转蒸发仪(Heidolph-4000型号)、周转式振荡器(MSI)以及0.45m的有机微孔滤膜。
　　2.2 试验试剂
　　实验主要用到的试剂有：氯霉素标准物质(纯度98.5%)、乙腈(色谱纯)、甲醇(色谱纯)以及由实验室自制的超纯水。
　　2.3 标准溶液配制
　　精密称取氯霉素标准品50mg并置于50mL容量瓶中，然后用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为1.0mg/L的储备液，贮存于4℃冰箱中。储备液待使用时再配制成相应浓度的溶液。
　　2.4 牛奶试样配制
　　选用牛奶为待检测食品，将一定量的氯霉素标准储备液添加到不含氯霉素的牛奶样品中，分别配制成1.0mg/L、2.0mg/L、5.0mg/L和10.0 mg/L 的供试样品。
　　2.5 供试样品提取
　　精密吸取牛奶供试样品10.00mL，置于离心管中，加入乙腈定容，涡旋振荡1min后，超声提取10min。然后以5000 r/min的转速离心10min，移取上清液至100mL蒸发瓶中，重复提取2次，合并上清液，上清液使用旋转蒸发仪于35℃旋转蒸发至近干，用甲醇定容至5.0mL，经0.45m有机滤膜过滤，试液供液相测定。
　　3 实验结果讨论
　　3.1 液相色谱条件的建立
　　取氯霉素标准储备液进行相应的稀释，然后在紫外分光光度计上扫描石英比色皿。由试验分析可以看出，氯霉素在278 nm处有吸收峰，故选择氯霉素检测波长为278nm。
　　液相色谱条件为：色谱柱采用岛津Shim-Pack VP-ODS(150.04.6 mm，5m);流动相为甲醇-水溶液(体积比为40∶60)，流速1.0mL/min;波长278nm;柱温30℃;进样量10L。
　　3.2 标准曲线的绘制
　　取一定量的标准储备液并稀释成质量浓度分别为1mg/L、5mg/L、10mg/L、15mg/L、20mg/L、25mg/L以及30 mg/L的标准系列溶液。经过计算可知，在1～30mg/L的范围内，氯霉素标准曲线的回归方程为Y=0.2027X+0.4474，相关系数r2=0.9994。
　　3.3 方法回收率与精密度
　　按第3节所述进行牛奶的供试样品提取，测定氯霉素含量并计算回收率，每个水平进行3次重复试验，结果见表1。
　　由表1可知，样品平均回收率在85.67%～98.20%的范围内，RSD为2.81%～8.76%。
　　4 结语
　　采用液相色谱法检测食品中的氯霉素残留具有快速、准确的特点，并且在氯霉素检测中得到了广泛的应用。而为了实现更加高效精确的检测，还需要相关技术人员作更进一步的研究和努力。
　　参考文献
　　[1] 张杰，许家胜，刘连利.高效液相色谱法测定牛奶中的氯霉素残留[J].化学研究与应用，2013(4)：593-595.