作者单位：110004 沈阳，中国医科大学附属盛京医院急诊科（孙健波、李刚、其其格、金帅、贾冬、桑珍珍、赵敏）；中国医科大学实验技术中心一部（顾鹏毅） 简历大全 http:///html/jianli/
【摘要】目的 探讨孟鲁司特对百草枯（PQ）中毒所致大鼠肺组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、肺湿/干质量比（W/D）和血清中肿瘤坏死因子（TNF-）、白细胞介素-10（IL-10）、肺组织中核因子B（NF-Bp65）及肺组织病理变化的影响。方法 取SD大鼠104只，随机（随机数字法）分为3组，PQ组40只、孟鲁司特组40只、对照组24只。PQ组和孟鲁司特组用百草枯一次性染毒，分别在不同处理后第1、3、5、7天时处死大鼠。观察肺组织中MDA和SOD含量、肺湿/干质量比（W/D）、血清TNF-、IL-10含量及肺组织中NF-Bp65含量，并取肺组织制备标本分别在光镜和电镜下观察肺组织的病理改变。结果 PQ组第7天时肺组织中MDA含量、肺组织湿/干质量比、血清TNF-和IL-10含量、肺组织中NF-Bp65含量明显高于对照组，SOD含量明显低于对照组，差异均具有统计学意义（P0.01）。孟鲁司特组第7天时肺组织中MDA含量、肺组织湿/干质量比、血清TNF-和IL-10含量、肺组织中NF-Bp65含量明显低于PQ组，SOD含量明显高于PQ组，差异均具有统计学意义（P0.05）。光镜及电镜观察PQ组病理学改变为急性弥漫性肺损伤，表现为肺泡腔内出血、渗出、炎性细胞浸润，Ⅰ型和Ⅱ型上皮细胞坏死脱落；孟鲁司特组大鼠肺组织病理改变为局灶性肺泡少量炎性细胞浸润，Ⅰ型上皮细胞完整，Ⅱ型上皮细胞未见明显坏死。结论 孟鲁司特对百草枯中毒所致大鼠急性肺损伤具有一定的保护作用。 思想汇报 http:///sixianghuibao/
【关键词】孟鲁司特；百草枯；中毒；肺损伤；丙二醛；超氧化物歧化酶；白细胞介素-10；核因子B Empirical study of therapeutic effect of montelukast on acute lung injury induced by paraquat in rats SUN Jian-bo*，GU Peng-yi， LI Gang， QI Qi-ge， JIN Shuai， JIA Dong， SANG Zhen-zhen， ZHAO Min.*Department of Emergency， Shengjing Hospital of China Medical University， Shenyang 110004， China 简历大全 http:///html/jianli/ Corresponding author：ZHAO Min，Email：zhaom@sj-hospital.org 【Abstract】Objective To discuss the effect of Montelukast （Mont） on MDA，SOD，W/D，TNF-，IL-10 and NF-Bp65 in lung tissue of Wistar rats poisoned by paraquat（PQ） and also to observe the pathological changes of the lung tissue. Methods A total of 104 Wistar rats were divided into 3 groups in random （random number）， namely PQ group （n=40）， Mont group （n=40） and control group （n=24）. PQ （20 mg/kg） was administered by intra-peritoneal route to rats of PQ group and Mont group and narcotics were used for 2 hours. Mont in dose of 50 mg/kg was administered intra-gastrically to rats of Mont group per day and saline instead were administered to PQ group and control group per day until they were sacrificed for experiment. Of both PQ group and Mont group， 10 rats were sacrificed at each interval of 1，3，5 and 7 days respectively after modeling， whereas 6 rats of control group were sacrificed at each interval. The levels of MDA and SOD in lung tissue and W/D of lung tissue， the levels of serum TNF- and IL-10 and the level of NF-Bp65 in lung tissue were determined. Further， the specimen of lung tissue was prepared for electron microscopy observation.Results The level of MDA in lung tissue of PQ group was （8.190.53） nmol/mg prot， which was significantly higher than that of control group on the 7th day. The level of SOD in lung tissue of PQ group was （128.7610.18） U/mg prot， which was significantly lower than that of control group. In PQ group， the W/D of lung tissue （6.620.42）， level of serum TNF- （156.1611.13） pg/ml， level of IL-10 （43.634.44） pg/ml and level of NF-Bp65 in lung tissue （0.230.02） were significantly higher than those in control group （P0.01）. In Mont group on the 7?th day， the level of serum TNF- （129.9913.13） pg/ml， level of serum IL-10 （34.283.80） pg/ml and level of NF-Bp65 in lung tissue （0.200.02） were significantly lower than those in PQ group （P0.01）. In the PQ group， pathological changes of lung tissue under the light and electron microscopes were acute diffused lung injury manifested itself in hemorrhage， effusion and infiltration of inflammatory cells inside the alveolar space， and the necrosis and defluxion of Ⅰ type and Ⅱ type epithelia cells. The pathological changes in Mont group were localized with infiltration of scanty inflammatory cells， and Ⅰ type epithelia cells were intact and there was no obvious necrosis of Ⅱ type epithelia cells.Conclusions Mont has protective effects on acute lung injury caused by PQ poisoning in rats. 代写论文 http://
【Key words】Montelukast；Paraquat；Intoxication；Lung injury；MDA；SOD；IL-10；NF-B 百草枯（paraquat，PQ）是一种对人类和动物有较强毒性的接触性除草剂[1]。PQ进入机体后能很快地分布于大部分组织中，其中主要集中在肺并且造成肺损伤，这主要是由于PQ通过多胺摄取途径在肺的蓄积并且诱导氧化还原反应，导致氧化应激相关的细胞坏死和炎症的发生[2]。PQ诱导的肺损伤主要是由于肺泡型和Ⅱ型上皮细胞早期的破坏和肺泡炎、肺水肿、炎症细胞浸润导致的，并且最终引起肺纤维化。由于目前无确切的解毒药物，因此，PQ中毒的治疗研究主要集中在减轻肺损伤方面。 简历大全 http:///html/jianli/ 选择性白三烯D4受体拮抗剂孟鲁司特主要是减少哮喘患者气道中的炎症，并且也可以治疗过敏性鼻炎、慢性阻塞性肺疾病（COPD）和特发性肺纤维化[3]。孟鲁司特对重要脏器损伤的保护作用主要是抑制中性粒细胞浸润，调节炎症介质的产生，另外孟鲁司特还是潜在的抗氧化剂[4]。本实验旨在探讨孟鲁司特对百草枯中毒所致大鼠急性肺损伤是否具有保护作用。 论文代写 http:// 1 材料与方法 1.1 实验动物和试剂 思想汇报 http:///sixianghuibao/ 健康成年清洁级SD大鼠104只，雌雄各半，体质量180～220 g，购自中国医科大学动物部，标准喂养。主要试剂为百草枯标准品（Sigma公司），孟鲁司特钠片（杭州默沙东制药有限公司，10 mg/片），SABC免疫组化染色试剂盒、DAB显色试剂盒、兔抗大鼠NF-Bp65多克隆抗体（武汉博士德生物工程有限公司），SOD、MDA、TNF-及IL-10酶联免疫试剂盒（南京建成生物有限公司）。 1.2 方法
1.2.1 动物分组及中毒模型建立与给药 采用随机数字表法，将大鼠分为3组，对照组24只，PQ组和孟鲁司特组各40只。PQ组和孟鲁司特组用百草枯20 mg/kg腹腔注射，一次性染毒，孟鲁司特组从染毒后2 h开始，给予孟鲁司特50 mg/kg灌胃，1次/d，至处死前；PQ组及对照组用等量生理盐水灌胃，1次/d，至处死前。 1.2.2 标本采集与检测 各组分别于染毒后1、3、5、7 d分批处死，每个时间点对照组6只，PQ组和孟鲁司特组各10只，用10%水合氯醛腹腔注射麻醉后，腹部常规酒精消毒，打开腹腔，腹主动脉采血3～5 ml（采血的注射器及试管均在实验前用500 U/ml肝素湿润），以3000 r/min离心10 min取上清液，-70 ℃保存待测。剪下整个肺脏，分成左右两肺，用灭菌的生理盐水冲洗3次，取左肺上叶，称湿质量后，置烤箱烤至恒重，称干质量，计算湿/干质量比；其余左肺留待作SOD、MDA检测，标本测定的操作步骤严格按试剂盒说明进行，MDA含量检测采用硫代巴比妥酸比色法，SOD活力检测采用黄嘌呤氧化酶法。取右肺上叶用4%多聚甲醛固定，包埋，切片，常规苏木素-伊红（HE）染色，光镜观察病理改变；右肺下叶用2.5%戊二醛固定，制备电镜标本，电镜观察病理改变。血清TNF-及IL-10含量的检测采用ELISA法，测定的操作步骤严格按试剂盒说明进行；肺组织NF-Bp65的测定采用免疫组化连霉亲和素-生物素标记（SABC）法进行染色，观察NF-Bp65在大鼠肺组织中的表达和分布情况。一抗选用兔抗大鼠NF-Bp65多克隆抗体，稀释浓度为1∶100，用SABC试剂盒，按说明书依次进行操作。镜下随机选取5个高倍视野，以胞膜/胞浆/胞核出现棕黄色着色颗粒为阳性标记，然后运用免疫组化分析软件IPP（Imagepro Plus）进行图像分析，分别计算每个视野阳性染色的平均光密度值（MOD），取其平均值进行统计学处理。 论文代写 http:// 1.3 统计学方法 所有统计采用SPSS 17.0软件进行分析。计量资料采用均数标准差（xs）表示，单因素两组以上的均数间差异比较用单因素方差分析（One Way ANOVA）。以P0.05为差异具有统计学意义。 开题报告 http:///html/lunwenzhidao/kaitibaogao/
2 结果 2.1 动物存活情况 总结大全 http:///html/zongjie/
PQ组第1、3、5天分别死亡2、5、5只大鼠；孟鲁司特组第1、3、5天分别死亡2、4、5只大鼠；第7天时PQ组10只大鼠死亡7只，孟鲁司特组10只大鼠死亡5只，对照组第1、3、5、7天均无大鼠死亡。 2.2 肺组织MDA和SOD含量变化
PQ组肺MDA含量在第1、3天时增高明显，与对照组比较差异具有统计学意义（P0.01），第5、7天时较第1、3天有所下降，但仍高于对照组，且差异具有统计学意义（P0.01）。孟鲁司特组肺MDA含量在第 1、3、5、7天时均低于PQ组，差异具有统计学意义（P0.05），但仍高于对照组，差异具有统计学意义（P0.01）。 PQ组肺SOD含量在第 1、3、5、7天时呈逐渐下降趋势，明显低于对照组，差异具有统计学意义（P0.01）。孟鲁司特组肺SOD含量在第 1、3、5、7天时均高于PQ组，且差异具有统计学意义（P0.05）。见表1。 思想汇报 http:///sixianghuibao/ 2.3 肺组织湿/干质量比（W/D） PQ组肺W/D在第 1、3、5、7天时均明显高于对照组，差异具有统计学意义（P0.01）。孟鲁司特组与PQ组同时间点比较，肺W/D均降低，且差异具有统计学意义（P0.05），与对照组比较，差异具有统计学意义（P0.01），见表1。 论文网 http:// 2.4 血清TNF-和IL-10含量变化 PQ组血清TNF-含量在第3 天时增高较明显，第5、7 天时有所回降，与对照组比较差异均具有统计学意义（P0.01）。孟鲁司特组血清TNF-含量在第 1、3、5、7 天时均低于PQ组，差异具有统计学意义（P0.05），但高于对照组，差异具有统计学意义（P0.01），见表2。 开题报告 http:///html/lunwenzhidao/kaitibaogao/ PQ组血清IL-10含量在第1、3、5、7 天时均明显高于对照组，差异具有统计学意义（P0.01）。孟鲁司特组血清IL-10含量在第 1、3、5、7 天时均低于PQ组，且差异具有统计学意义（P0.05），见表2。 http://
发表于 2018-8-18 22:13:35