摘要：目的考察三七多糖（PNP）的毒理学安全性。方法进行急性经口毒性试验；三项遗传毒性试验（Ames试验、骨髓微核试验、小鼠精子畸形试验）；30天喂养试验。结果以最大给药量（剂量为30000 mg?kg-1 W）的样品给予小鼠灌胃后，未见动物有中毒症状，无动物死亡，试验结束解剖动物，大体观察未见异常，急性经口毒性属无毒级；三项遗传毒性试验结果均为阴性；以2670、2000、1335 mg?kg-1 W（分别相当于人体推荐用量100、75、50倍）3个剂量的样品连续给大鼠灌胃30 d，实验期间动物的生长发育良好，各剂量组的动物体重、增重量、进食量、食物利用率、血常规指标、血生化指标、脏器重量及脏器/体重比值与对照组比较，均无显著性差异（P>0.05）；大体解剖观察和组织病理学检查未见与样品有关的异常改变。在受试剂量范围内未见该样品对大鼠各项观察指标产生毒副作用。结论三七多糖具有良好的安全性。
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关键词：三七多糖；安全性；急性毒性；遗传毒性；30天喂养试验
中图分类号：R965.3文献标志码：A文章编号：1007-2349（2017）12-0056-05
【Abstract】Objective： To study the toxicological safety of Panax Notoginseng polysaccharide （PNP）. Methods： Acute oral toxicity test， three genotoxicity tests （Ames test， bone marrow micronucleus test and mouse sperm abnormality test） and 30 days feeding test were conducted. Results： After the mice were given gavage with the maximal dose （30000 mg?kg-1 W）， no animals were poisoned and no animals were killed. At the end of the experiments， the animals were dissected and no abnormalities were observed. The acute oral toxicity was non-toxic. The three genotoxicity test results were negative. The rats were given gavage with 2670， 2000 and 1335 mg?kg-1 W （respectively equivalent to the weight of human body recommended dose 100， 75 and 50 times） for 30 days. The growth and development of the animals during the experiments were good. Compared with those of the control group， the weight， weight gain， food intake， food utilization， blood index， blood biochemical index， organ weight and organ/body weight ratio of each group with different doses had no significant difference （P>0.05）. There were no abnormal changes related to the samples in the gross anatomy and histopathological examination. In the dose range of the samples，the side effects of various indicators of rat toxicity were not seen. Conclusion： Panax notoginseng polysaccharide has good safety.
【Key words】Panax notoginseng polysaccharide， safety， acute toxicity， genotoxicity， 30-day feeding test
三七[Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen]?槲寮涌迫瞬问舳嗄晟?草本植物，又名参三七、田七等名。三七自古以来是传统的名贵中药材，主产地云南文山。三七的化学研究始于二十世纪三十年代，而随着配糖体成分分离和结构鉴定技术的发展，自八十年代以来才有显著进展[1]。三七中的化学成分，包括皂苷（saponins），多糖（polysaccharides），黄酮（flavonoids），聚炔醇（polyalkynols），氨基酸（amino acids）和脂肪酸（fatty acids），以及环肽类（cyclopeptides）等，但目前对三七的研究主要集中在皂苷类化合物，对其他有效成分的研究不足。多糖几乎存在于所有的动物、植物及微生物体内，参与机体生理代谢，具有降血糖、降血脂、预防和治疗糖尿病、抗肿瘤、抗氧化等生理功能[2-6]，因此备受关注。本课题组多年来从事三七资源的开发利用，从提取过三七皂苷的三七废渣中，提出了含量为56.70%，得率为1.71%（三七干燥药材的百分比）的三七多糖[7]；发现三七多糖可提高小鼠的细胞免疫与体液免疫[8]；能延长荷肝癌H22小鼠生存期[9]。为了进一步开发利用三七多糖，本文研究其毒理学安全性，以期为三七多糖的开发应用提供依据。 2.5.2实验方法实验期间所有动物给予普通饲料，单笼饲养，自由摄食饮水。每天观察动物的活动和生长情况，每周加食2次，记录给食量和剩食量，每周称一次体重，计算每周进食量和食物利用率。实验结束动物禁食过夜，次日早上称动物空腹体重，然后处死大鼠，采2份血样，一份血抗凝用血球计数仪检测Hb、RBC、WBC及其分类、PLT等；另一份血不抗凝分离血清，用试剂盒和全自动生化分析仪检测血清AST、ALT、BUN、Cr、TC、Tg，Glu、TP、Alb等?目。采血后解剖动物，
进行大体观察，取肝脏、肾脏、脾脏和睾丸等脏器进行称重，计算脏/体比值，取肝脏、肾脏、脾脏、胃、十二指肠、睾丸和卵巢等脏器进行病理组织学检查。在对各剂量组动物作大体检查未发现明显病变和生化指标改变时，只进行高剂量组和对照组动物的主要脏器的组织病理学检查，如发现病变则对中、低剂量组相应器官及组织进行检查。
2.5.3实验数据统计应用SPSS统计软件进行单因素方差分析。在统计分析时，先对数据进行方差齐性检验，若方差齐，采用单因素方差分析进行总体比较，发现差异再用Dunnett检验进行多个剂量组与对照组均数间的两两比较。若方差不齐则对数据进行适当的变量转换，满足方差齐性检验后，用转换后的数据进行统计；若转换数据仍未达到方差齐要求，改用秩和检验进行统计分析。
3结果
3.1急性经口毒性试验采用最大给药量的样品给小鼠灌胃后，观察小鼠14天，雄性小鼠初始、第7天、第14天平均体重分别为（20.0±0.4）g，（26.3±1.0）g，（32.2±1.3）g，雌性小鼠初始、第7天、第14天平均体重分别为（20.2±0.6）g，（26.0±0.9）g，（30.9±1.3）g，小鼠生长良好，体重未受影响。无中毒症状，未发现死亡小鼠。试验结束解剖动物、大体观察，肝、肾等主要脏器均未见明显异常改变，根据急性毒性分级标准，三七多糖的急性经口毒性属无毒级。
3.2Ames试验从表1、表2可见，受试物的回变菌落数均未超过自发回变菌落数的2倍，也无剂量-反应关系，该受试物诱变试验结果为阴性。
3.3小鼠骨髓细胞微核试验试验组3个剂量分别是10000、5000、2500 mg?kg-1 BW。雄性小鼠组，微核发生率（‰）分别为（0.6±0.5）、（1.2±0.8）、（1.0±0.0），与阴性对照组（1.2±0.4）无显著性差异（P>0.05），阳性对照组（26.2±2.8）与阴性对照组有显著性差异（P0.05），阳性对照组（24.4±4.0）与阴性对照组有显著性差异（P0.05），阳性对照组（4.32±0.48）与阴性对照组有显著性差异（P0.05），表明三七多糖对大鼠的体重及食物利用率无明显影响。
3.5.4三七多糖对大鼠血液生化指标的影响结果见表5，以 2670、2000、1335 mg?kg-1 BW 剂量的三七多糖给大鼠灌胃30天，各剂量组大鼠的AST、ALT、BUN、Cr、TC、Tg，Glu、TP、Alb对照组无显著性差异（P>0.05），表明三七多糖对大鼠的血液生化指标无明显影响。
3.5.5三七多糖对大鼠脏器重量及脏器/体重比值的影响以2670、2000、1335 mg?kg-1 BW 剂量的三七多糖给大鼠灌胃30天，采血后解剖动物，进行大体观察，取肝脏、肾脏、脾脏和睾丸等脏器进行称重，计算脏/体比值，各剂量组大鼠的脏器重量及脏器/体重比值与对照组无显著性差异（P>0.05），表明三七多糖对大鼠的脏器重量及脏器/体重比值无明显影响。
3.5.6解剖大体观察及组织学检查结果实验结束解剖动物，大体观察各组动物均未发现明显病变。故只选三七多糖的高剂量组和阴性对照组动物的主要脏器进行组织病理切片检查。结果显示，高剂量组有1只雌性、对照组有1只雄性和1只雌性大鼠的肝脏组织可见肝细胞点状坏死，高剂量组有1只雄性、对照组有1只雄性和1只雌性大鼠的肝脏汇管区可见少量炎细胞浸润；两组均有1只雄性和1只雌性大鼠的肾脏皮质部间质可见少量炎细胞浸润。以上组织病变属动物的自发轻型病变，且两组动物的组织病变程度相似，故可以排除是三七多糖所致，其他脏器组织未见病理组织学改变，表明三七多糖对大鼠的上述脏器组织无损害作用。
4结论
以最大给药量（剂量为30000 mg?kg-1 BW）的三七多糖给予小鼠灌胃后，未见动物有中毒症状和死亡，急性经口毒性属无毒级。
三项遗传毒性试验（Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验）结果均为阴性。30天喂养试验，以2670、2000、1335 mg?kg-1 BW 3个剂量（分别相当于人体推荐用量100、75、50倍）的三七多糖连续给大鼠灌胃30天，实验期间动物生长发育良好，各剂量组大鼠的体重、增重量、进食量、食物利用率、血常规指标、血液生化指标、脏器重量及脏器/体重比值等均未受明显影响；大体解剖观察和组织病理学检查未见与三七多糖有关的异常改变。在受试剂量范围内未见三七多糖对大鼠各项观察指标产生毒副作用。 致谢：感谢广西壮族自治区疾病预防控制中心毒理室对本项目的支持。参考文献：
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（收稿日期：2017-10-24）
发表于 2018-8-18 08:58:42