2018地锦草化学成分研究

1577608

　　【摘要】目的：研究地锦草的化学成分。方法：采用硅胶、聚酰胺和 Sephadex LH-20柱色谱分离，通过理化性质和光谱数据确定结构。结果：从乙醇提取物的正丁醇萃取部分分得8个化合物，其结构分别鉴定为芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷（Ⅰ）、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷（Ⅱ）、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷（Ⅲ）、槲皮素（Ⅳ）、短叶苏木酚（Ⅴ）、槲皮素-7-O-β-D -葡萄糖苷（Ⅵ）、紫云黄芪苷-6″-O-没食子酸酯（Ⅶ）、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖（1→6）-β-D-吡喃半乳糖苷（Ⅷ）。结论：化合物Ⅲ，Ⅵ，Ⅶ和Ⅷ均为首次从该植物中分离得到。
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　　【关键词】地锦草；化学成分；黄酮；短叶苏木酚
　　
　　【中图分类号】R668 【文献标识码】B 【文章编号】1005-0515(2011)06-0298-02
　　 地锦草为地锦Euporbia humifusa Willd或斑地锦Euporbia maculata L..的干燥全草。地锦草分布广泛，资源丰富。历版《中国药典》均收载地锦草，其味辛，性平，归肝、大肠经，具有清热解毒，凉血止血之功效。药理研究表明地锦草具有抗菌、抗病毒、止血、止泻、抗氧化、保肝、抑制肾功能损伤、抗肿瘤、抗焦虑和镇痛等作用[1]。已报道的文献中关于地锦草化学成分的研究较少，为探寻其有效成分，本文对地锦草进行了系统的化学成分研究，从乙醇提取物的正丁醇萃取部分得到了8个化合物（Ⅰ~Ⅷ），其中化合物Ⅲ，Ⅵ，Ⅶ和Ⅷ为首次从该植物中分离得到。
　　1 仪器与材料
　　Yanaco MP-S3显微熔点测定仪；HITACHI 200-20型紫外分光光度计；Bruker ARX-300型核磁共振仪（TMS为内标，DMSO-d6为溶剂）；Shimadzu 2010型质谱仪。柱色谱用硅胶及薄层色谱用硅胶G（青岛海洋化工厂）；柱色谱用聚酰胺及薄层色谱用聚酰胺（浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂）；Sephadex LH-20（Pharmacia公司）。
　　地锦草于购自河北祁新中药颗粒饮片有限公司。槲皮素对照品（中国药品生物制品检定所）。
　　2 提取与分离
　　地锦草干燥全草5.0 kg，95 %乙醇回流提取3次，趁热过滤，合并滤液，减压回收乙醇，浸膏加适量水分散，依次用石油醚（60 ~ 90 ℃）、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到相应萃取物。正丁醇萃取物（80 g）经硅胶柱色谱，氯仿-甲醇（100 : 0 ~ 0 : 100）梯度洗脱，共收集到363个流分，每个流分约2700 mL。Fr.109 ~ 186得到化合物Ⅰ，Ⅱ，Ⅴ的粗品，化合物Ⅰ，Ⅱ，和Ⅴ的粗品，用Sephadex LH-20柱色谱（甲醇洗脱）进行纯化，分别得到化合物Ⅰ（308 mg），Ⅱ（425 mg）和Ⅴ（186 mg）。Fr.66 ~ 89（1.9 g），Fr.153 ~ 159（1.1 g），和Fr.195 ~ 201（5.0 g）经聚酰胺和Sephadex LH-20柱色谱纯化，分别得到化合物Ⅳ（47 mg），Ⅲ（36 mg）和Ⅷ（72 mg）。Fr.171 ~ 194（6.0 g）经聚酰胺和Sephadex LH-20柱色谱纯化，得到化合物Ⅵ（27 mg）和Ⅶ（35 mg）。
　　3 结构鉴定
　　化合物Ⅰ 浅黄色粉末（甲醇），mp 226~228 ℃，盐酸镁粉反应阳性，三氯化铝反应呈黄绿色荧光。UV（MeOH）nm：270，335。ESI-MS m/z：431[M - H]-。1H-NMR（DMSO-d6）δ：12.97（1H，s，5-OH），10.42（1H，s，4′-OH），7.97（2H，d，J = 8.7 Hz，H-2′，6′），6.94（2H，d，J = 8.7 Hz，H-3′，5′），6.88（1H，s，H-3），6.84（1H，s，H-8），6.45（1H，s，H-6）。13C-NMR（DMSO-d6）δ：182.7（C-4），165.0（C-7），163.6（C-2），162.0（C-5），161.8（C-4′），157.7（C-9），129.4（C-2′，6′），121.7（C-1′），116.8（C-3′，5′），106.0（C-10），103.7（C-3），100.6（C-1″）100.2（C-6），95.6（C-8），77.8（C-5″），77.0（C-3″），73.8（C-2″），70.3（C-4″），61.3（C-6″）。以上数据与文献[2]报道一致，故鉴定为芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷。
　　化合物Ⅱ 浅黄色粉末（甲醇），mp 252~254 ℃，盐酸镁粉反应阳性，三氯化铝反应呈黄绿色荧光。UV（MeOH）nm：258，348。ESI-MS m/z：447[M - H]-。1H-NMR（DMSO-d6）δ：12.97（1H，s，5-OH），7.45（1H，dd，J = 8.3，2.3 Hz，H-6′），7.42（1H，d，J = 2.3 Hz，H-2′），6.90（1H，d，J = 8.2 Hz， H-5′），6.79（1H，d，J = 1.9 Hz，H-8），6.76（1H，s，H-3），6.45（1H，d，J=1.9 Hz，H-6），5.08（1H，d，J = 7.1 Hz，H-1″）。?13C-NMR（DMSO-d6）δ：182.0（C-4），164.6（C-2），163.0（C-7），161.2（C-5），157.0（C-9），150.1（C-4′），145.9（C-3′），121.4（C-1′），119.3（C-6′），116.1（C-5′），113.6（C-2′），105.4（C-10），103.7（C-3），99.9（C-1″），99.7（C-6），94.8（C-8），77.2（C-3″），76.5（C-5″），73.2（C-2″），69.6（C-4″），60.7（C-6″）。以上数据与文献[2]报道一致，故鉴定为木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷。
　　化合物Ⅲ 浅黄色簇状结晶（甲醇），mp 171~173 ℃，盐酸镁粉反应阳性，三氯化铝反应呈黄色荧光。UV（MeOH）nm：266，350。ESI-MS m/z：447[M - H]-。??1H-NMR（DMSO-d??6）δ：12.62（1H，s，5-OH），10.85（1H，s，7-OH），10.20（1H，s，4 ′-OH），8.04（2H，d，J = 8.7 Hz，H-2′，6′），6.89（2H，d，J = 8.7 Hz，H-3′，5′），6.44（1H，d，J = 2.0 Hz， H-8），6.21（1H，d，J = 2.0 Hz，H-6），5.47（1H，d，J = 7.2 Hz，H-1″）。?13C-NMR（DMSO-d6）δ：177.6（C-4），164.2（C-7），161.3（C-5），160.0（C-4′），156.5（C-2），156.3（C-9），133.3（C-3），131.0（C-2′，6′），121.0（C-1′），115.2（C-3′，5′），104.1（C-10），100.9（C-1″）98.8（C-6），93.8（C-8），77.6（C-5″），76.5（C-3″），74.3（C-2″），70.0（C-4″），60.9（C-6″）。以上数据与文献[3]报道一致，故鉴定为山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷。

  
  
       　　化合物Ⅳ 黄色粉末（甲醇），mp 298~300 ℃，盐酸镁粉反应阳性，三氯化铝反应呈黄绿色荧光。UV（MeOH）nm：257，375。ESI-MS m/z：301[M - H]-。1H-NMR（DMSO-d6）δ：12.50（1H，s，5-OH），10.77（1H，s，7-OH），9.37（3H，brs，3-OH，3 ′-OH，4 ′-OH），7.67（1H，d，J = 1.8 Hz，H-2′），7.54（1H，dd，J = 8.7，1.8 Hz，H-6′），6.88（1H，d，J = 8.4 Hz， H-5′），6.40（1H，d，J = 1.5 Hz，H-8），6.18（1H，d，J = 1.5 Hz，H-6）。以上数据与文献[4]报道一致，且薄层色谱Rf值与槲皮素对照品一致，故鉴定为槲皮素。
　　化合物Ⅴ 浅黄色粉末（甲醇），mp ＞300 ℃，盐酸镁粉反应阳性，三氯化铝反应呈蓝色荧光。UV（MeOH）nm：276。ESI-MS m/z：247[M - H]-。??1H-NMR（DMSO-d6）δ：7.26（1H，s，H-7），3.18（2H，m，H-3），2.51（2H，m，H-2）。?13C-NMR（DMSO-d6）δ：195.6（C-1），160.7（C-11），149.4（C-12），145.1（C-10），144.4（C-8），141.6（C-9），140.7（C-5），115.5（C-4），112.9（C-6），108.0（C-7），33.1（C-2），24.0（C-3）。以上数据与文献[5]报道一致，故鉴定为短叶苏木酚。
　　化合物Ⅵ 浅黄色粉末（甲醇），mp 221~223 ℃，盐酸镁粉反应阳性，三氯化铝反应呈黄绿色荧光。UV（MeOH）nm：256，373。ESI-MS m/z：463[M - H]-。1H-NMR（DMSO-d6）δ：12.53（1H，s，5-OH），7.72（1H，d，J = 2.1 Hz，H-2′），7.57（1H，dd，J = 8.7，2.1 Hz，H-6′），6.90（1H，d，J = 8.7 Hz，H-5′），6.77（1H，d，J = 1.8 Hz，H-8），6.42（1H，d，J = 2.1 Hz，H-6），5.08（1H，d，J = 7.2 Hz，H-1″）。13C-NMR（DMSO-d6）δ：176.1（C-4），162.8（C-7），160.5（C-5），155.8（C-9），148.0（C-4′），147.7（C-2），145.2（C-3′），136.2（C-3），122.0（C-1′），120.1（C-6′），115.7（C-5′），115.5（C-2′），104.8（C-10），99.9（C-1″），98.8（C-6），94.3（C-8），77.3（C-5″），76.5（C-3″），73.2（C-2″），69.6（C-4″），60.7（C-6″）。以上数据与文献[6]报道一致，故鉴定为槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷。
　　化合物Ⅶ 浅黄色粉末（甲醇），盐酸镁粉反应阳性，三氯化铝反应呈黄色荧光。UV（MeOH）nm：267，347。ESI-MS m/z：599[M - H]-。??1H-NMR（DMSO-d?6）δ：7.94（2H，d，J = 9.0 Hz，H-2′，6′），6.91（2H，s，H-2″′，6″′），6.76（2H，d，J = 8.7 Hz，H-3′，5′），6.38（1H，d，J = 2.1 Hz，H-8），6.18（1H，d，J = 1.8 Hz，H-6），5.45（1H，d，J = 7.2 Hz，H-1″），4.26（1H，d，J = 11.4 Hz，H-6″），4.21（1H，dd，J = 11.4，3.5 Hz，H-6″），3.43（1H，m，H-5″），3.30，3.27，3.25（each 1H，t，J = 7.5 Hz，H-2″，3″，4″）。13C-NMR（DMSO-d??6）δ：177.3（C-4），165.7(C-7″′),164.7（C-7），161.2（C-5），160.0（C-4′），156.8（C-9），156.5（C-2），145.6（C-3″′,5″′）,138.5（C-4″′）,133.2（C-3），130.8（C-2′，6′），120.7（C-1′），119.4（C-1″′），115.2（C-3′，5′），108.6（C-2″′，6″′），103.9（C-10），101.6（C-1″）99.0（C-6），93.9（C-8），76.2（C-3″），74.2（C-2″，5″），69.4（C-4″），62.8（C-6″）。以上数据与文献[7]报道一致，故鉴定为紫云黄芪苷-6″-O-没食子酸酯。
　　化合物Ⅷ 浅黄色针晶（甲醇），mp 196~198 ℃，盐酸镁粉反应阳性，三氯化铝反应呈黄色荧光。ESI-MS m/z：609[M - H]-。??1H-NMR（DMSO-d??6）δ：12.60（1H，s，5-OH），7.66（1H，dd，J = 8.5，2.1 Hz，H-6′），7.52（1H，d，J = 2.1 Hz，H-2′），6.82（1H，d，J = 8.5 Hz，H-5′），6.39（1H，d，J = 2.0 Hz，H-8），6.19（1H，d，J = 2.0 Hz，H-6），5.32（1H，d，J = 7.6 Hz，H-1″），4.42（1H，s，H-1″′），3.06~3.60（m，glc-H），1.06（3H，d，J = 6.1 Hz，6″-CH3）。13C-NMR（DMSO-d?6）δ：177.5（C-4），164.2（C-7），161.3（C-5），156.5（C-2），156.4（C-9），148.6（C-4′），144.9（C-3′），133.6（C-3），122.0（C-6′），121.1（C-1′），116.0（C-2′），115.2（C-5′），104.0（C-10），102.1（C-1″），100.1（C-1″′），98.8（C-6），93.6（C-8），73.6（C-3″），73.1（C-5″），72.0（C-4″′），71.2（C-2″），70.7（C-2″′），70.5（C-3″′），68.3（C-5″′），68.1（C-4″），65.2（C-6″），18.0（C-6″′）。以上数据与文献[8]报道一致，故鉴定为槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖（1→6）-β-D-半乳糖苷。
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　　作者单位：110024 沈阳兴齐制药有限公司?1
　　110016 沈阳药科大学药学院?2