2018血府逐瘀汤对动脉粥样硬化金黄地鼠血清血脂和炎症因子的影响

8544117

　　[摘要] 目的 观察血府逐瘀汤对动脉粥样硬化金黄地鼠主动脉的病理变化、血脂和炎症因子的影响。 方法 32只雄性金黄地鼠随机分四组：正常组、模型组、血府逐瘀汤组[8.125 g/（kg?d）]、立普妥组 [2 mg/（kg?d）]，正常组喂食基础饲料，余组喂食高脂饲料8周，同时给予药物干预4周后处死，HE染色观察主动脉病理形态变化，ELISA检测血脂四项、血清炎症因子表达水平。 结果 模型组主动脉管腔狭窄、内膜增厚、泡沫细胞堆积、平滑肌细胞排列紊乱，总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、白细胞介素-6显著升高（P http://
　　[关键词] 动脉粥样硬化；血府逐瘀汤；血脂；炎症因子
　　[中图分类号] R289.5 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2017）34-0032-03
　　Effect of Xuefu Zhuyu decoction on serum lipids and inflammatory factors in atherosclerotic golden hamster
　　LIN Minyu LIN Shaobin YU Bijing LIU Jing
　　Department of Cardiology， Fuzhou Second Hospital， Fuzhou 350007， China
　　[Abstract] Objective To observe the effect of Xuefu Zhuyu decoction on the pathological changes， blood lipids and inflammatory factors in atherosclerosis golden hamster aorta. Methods 32 male golden hamsters were randomly divided into 4 groups including normal group， model group， Xuefu Zhuyu decoction group [8.125 g/（kg?d）]， Lipitor group [2 mg/（kg?d）] . Normal group was fed with basal diet. Other groups were fed with high-fat diet for 8 weeks， while were sacrificed after drug intervention for 4 weeks. HE staining was used to observe pathological changes of aorta. And ELISA was used to detect the expressions of four items of blood lipids and serum inflammatory cytokines. Results In the model group， the aortic lumen was narrow， endometrial was thickened， foam cell accumulated and smooth muscle cells arranged disorderly. And total cholesterol， triglyceride， high density lipoprotein， low density lipoprotein and interleukin-6 were significantly increased（P  　　1 材料与方法
　　1.1 实验动物
　　普通级雄性金黄地鼠32只，体重（120±10）g，许可证号码SCXK（沪）2012-0011，饲养于福建省中医药研究院比较医学中心（合格证号：医动学第23-016号）。
　　1.2 实验药物
　　血府逐瘀汤由桃仁12 g、红花9 g、当归9 g、生地黄9 g、牛膝9 g、川芎4.5 g、桔梗4.5 g、赤芍6 g、枳壳6 g、甘草6 g、柴胡3 g生药组成，颗粒剂由福州市第二医院颗粒药房提供。阿托伐他汀钙片（立普妥，20 mg，辉瑞制药有限公司）。
　　1.3 模型建立及干预
　　金黄地鼠采用高脂喂养建立动脉粥样硬化模型[3，4]，32只金黄地鼠随机分为四组：正常组、模型组、血府逐瘀汤组、立普妥组，每组8只。正常组喂食基础饲料，余组喂食高脂饲料：1%胆固醇、15%猪油、84%基础饲料，4周后进行药物干预，灌胃剂量按实验动物体表面积换算，血府逐瘀汤组给药量为8.125 g/（kg?d），立普妥组给药量为2 mg/（kg?d），模型组给予等量生理盐水，干预4周。
　　1.4 仪器和试剂
　　生物组织自动脱水机（亚光，TS-12U）；石蜡包埋机（亚光，BM-VⅡ）；切片机（Leica，RM2235）；显微镜（Leica，DM4000B）；多功能酶标仪（TECAN，Infinite 200 PRO）；苏木素染液、伊红染液（索莱宝）；TC、TG、HDL-C、LDL-C测试盒（南京建成）；IL-6、TNF-α、MPO测试盒（Invitrogen）。
　　1.5 样本收集
　　干预4周后取材，腹主动脉采血，3000 r/min，离心10 min，取血清，严格按测试盒说明书操作，酶标仪测定各孔吸光度。夹闭腹主动脉，取心脏、主动脉根部至腹主动脉待检。
　　1.6 组织形态学观察
　　置10%甲醛中常温固定24 h，取主动脉弓梯度乙醇脱水、二甲苯透明、石蜡包埋，横断面为切面，4 μm厚连续切片。切片脱蜡至水，苏木素15 min，1%盐酸酒精分色，返蓝20 min，伊红1 min，脱水、透明，封片，光镜下观察。
　　1.7 统计学方法
　　应用SPSS18.0软件分析，计量资料以（x±s）表示，正态分布检验齐采用单因素方差分析，正态分布检验不齐采用非参数检验，P  　　AS属“血瘀证”的范畴，其病机为气滞血瘀、痰浊寒凝、胸阳不振，主要治法为活血化瘀、通脉止痛、化痰理气、温阳宣痹等，以活血化瘀为主组方，血府逐瘀汤为代表方剂。血府逐瘀汤出自清代医家王清任《医林改错》，方由桃红四物汤合四逆散加桔梗、牛膝组成，桃仁、红花共为君药，破血活血、祛瘀止痛，川芎、赤芍、牛膝共为臣药，活血祛瘀、通经止痛、引血下行，生地、当归清热凉血、活血止痛，柴胡升阳疏肝，枳壳破气行痰，桔梗诸药之舟楫、载药上行达于胸中，共为佐药，甘草缓急止痛、调和药性为使药[11]。诸药配伍，共奏活血化瘀、行气止痛之功效，主治“胸中血府血瘀”之证。药理学研究表明：桃红四物汤具有改善血液循环，降低炎症因子，使炎性渗出、瘀血等能得到较好的吸收。同时研究发现血府逐瘀汤中含有预防血栓形成和改善血液循环的成分：赤芍能发挥很强的抗炎镇痛作用、当归能抑制慢性炎性损伤，对炎症后期肉芽组织增生也有一定的抑制作用，也可抑制Ⅱ型、Ⅲ型变态反应性炎症，丹参对血管平滑肌具有一定的促进功效，也能保护组织免受损伤[12-15]。
　　本研究采用血府逐瘀汤干预后主动脉中脂质斑块面积减小，三层结构较清晰，IL-6、TNF-α、MPO表达水平下降，表明本方可改善血管壁结构，减缓疾病进程，其作用机制一方面通过降低金黄地鼠血脂四项含量，改善脂代谢紊乱；另一方面通过降低金黄地鼠血清中炎症因子的表达水平，减轻动脉管壁炎症反应程度以抵抗AS，为其临床应用提供基础。
　　[参考文献]
　　[1] 董超，黄威，耿兆辉，等. 血府逐瘀汤对动脉粥样硬化大鼠细胞间黏附分子和脂质过氧化物的影响[J]. 河北大学学报（自然科学版），2012，32（6）：650-654.
　　[2] 黄威，董超，刘辉，等. 血府逐瘀汤对动脉粥样硬化大鼠前列环素及血栓素A2的影响[J]. 时珍国医国药，2012， 23（5）：1130-1132.
　　[3] 江春迎，杨康敏，杨柳，等. 金黄地鼠动脉粥样硬化发展过程中的NMR代谢组学研究[J]. 药学学报，2013，48（4）：495-502.
　　[4] 马宁，杨亚军，刘希望，等. 金?S地鼠动脉粥样硬化模型的病理观察和生化指标分析[J]. 中国兽医科学，2016， 46（9）：1177-1182.
　　[5] 郭永和，昝朝霞，张维君. 冠状动脉病变程度与血脂成分异常相关性分析[J]. 中国循环杂志，2009，24（2）：101-104.
　　[6] 刘红利，孙颖，郎艳松，等. 单核/巨噬细胞脂质代谢和炎症在动脉粥样硬化中的作用[J]. 细胞与分子免疫学杂志，2014，30（11）：1224-1227.
　　[7] 郭寻竹，宋丽萍. 兔动脉粥样硬化模型血清TNF-α与斑块内细胞凋亡的相关性研究[J]. 解放军医学院学报，2014，35（2）：174-177.
　　[8] 肖宪杰，纪焕春. 冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血清MMP-2、-9及IL-6水平及意义[J]. 中国老年学杂志，2014， 34（22）：6314-6315.
　　[9] 丁东新，薛冰，沈琪，等. 老年原发性高血压患者TNF-α、IL-6水平与血压、颈动脉粥样硬化的关系[J]. 同济大学学报（医学版），2013，34（05）：61-64.
　　[10] 陈彩霞，路永坤，鲍玉洲. 颈动脉粥样硬化斑块严重程度与血清CRP、IL-6、TNF-α水平的关系[J]. 山东医药，2011，51（13）：62-63.
　　[11] 吴剑宏，陈幸谊. 血府逐瘀汤方剂的现代药理研究进展[J]. 中成药，2013，35（05）：1054-1058.
　　[12] 丁艳，张前德.桃红四物汤临床与实验研究进展[J].江苏中医药，2010，42（1）：77-78.
　　[13] 刘勇，刘晋闽，刘卫兵，等.桃红四物汤对全膝置换术后D-二聚体影响的观察研究[J].山西中医药学报，2013， 14（2）：12-13.
　　[14] 居一春，李祥.桃红四物汤化学成分研究进展[J].医学导报，2008，27（5）：575-577.
　　[15] 张萌涛，钱亦华，唐安琪.丹参酮ⅡA药理作用的研究进展[J].医学综述，2010，16（17）：2661-2664.
　　（收稿日期：2017-09-15）