[摘要] 目的 探?基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）及其抑制剂（TIMP-1、TIMP-2）在非小细胞肺癌（NSCLC）患者中的表达及临床意义。 方法 选取2015年5月～2016年11月我院收治的非小细胞肺癌患者90例作为研究组、良性肺病患者80例作为对照组，采用免疫组化法分析两组患者肺病组织中的MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达。 结果 检测结果显示，研究组患者的MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达明显高于对照组（P http://
[关键词] 基质金属蛋白酶；抑制剂；非小细胞肺癌；诊断效果；临床价值
[中图分类号] R734.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2017）32-0012-04
[Abstract] Objective To investigate the expression and clinical significance of matrix metalloproteinases（MMP-2， MMP-9） and its inhibitors （TIMP-1， TIMP-2） in the patients with non-small cell lung cancer （NSCLC）. Methods A total of 90 patients with non-small cell lung cancer（NSCLC） who were admitted to our hospital from May 2015 to November 2016 were selected as the study group and 80 patients with benign pulmonary disease were selected as the control group. The expressions of MMP-9， MMP-2， TIMP-1 and TIMP-2 in lung disease tissues were analyzed by immunohistochemistry in both groups. Results According to the test results， the expressions of MMP-9， MMP-2， TIMP-1 and TIMP-2 in the study group were significantly higher than those in the control group（P [Key words] Matrix metalloproteinases； Inhibitors； Non-small cell lung cancer； Diagnostic effect； Clinical value
非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）是一种常见恶性肿瘤，包括腺癌、鳞癌和大细胞癌，几乎占肺癌总量的80%，非小细胞肺癌跟小细胞肺癌比较，非小细胞肺癌细胞的生长速度比较慢，扩散转移比较晚，很多患者在确诊时已经是中晚期了[1]。非小细胞肺癌患者的生存率比较低，大多数都是因为肿瘤出现了复发转移而导致死亡的，因此肿瘤的转移和生长是NSCLC诊断和治疗的关键。相关研究表明，非小细胞肺癌侵袭以及转移的能力除跟诱导其产生基质金属蛋白酶降解酶以及降解细胞基底膜和细胞外基质有关以外，关键的是基质金属蛋白酶及其抑制剂与NSCLC患者的肿瘤有密切关系[2]。本研究采用免疫组化法检测MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2在NSCLC组织中的表达，现报道如下。
1 资料与方法
1.1一般资料
选取2015年5月～2016年11月我院收治的非小细胞肺癌患者90例作为研究组，纳入标准：经病理检查已经确诊为非小细胞肺癌患者；在手术前未采用抗肿瘤药物等治疗；知情并同意本研究，经医院伦理委员会批准。排除标准：在手术前进行了抗肿瘤治疗的患者；不同意本研究的患者。研究组患者中男57例，女33例，年龄33～75岁，平均（51.39±5.14）岁；其中腺癌32例，鳞癌39例，腺鳞癌19例；依据国际抗癌联盟的分期标准：Ⅰ期患者29例，Ⅱ期患者30例，Ⅲ期患者31例；低分化患者57例，高分化患者33例；未出现淋巴转移患者36例，淋巴转移患者54例。选取80例良性肺病患者作为对照组，对照组中男48例，女32例，年龄34～74岁，平均（50.40±5.23）岁。两组患者在一般资料方面比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2方法
鼠抗人MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2单克隆的抗体以及S-P试剂盒由福建迈新生物有限公司生产，工作液的浓度一般采用1：50[3]。采用免疫组化法对S-P试剂进行染色，步骤为：将石蜡切片进行常规脱蜡，3%的H2O2甲醇溶液在室温孵育，时间为20 min，采用微波抗原进行修复，时间为15 min。等待室温冷却以后，37°C下将10%的羊血清孵育20 min，此时滴加一抗，分别为1：20的MMP-2抗体、1：15的MMP-9抗体以及1：20的TIMP-1抗体，TIMP-2是工作液，在4°C过夜[4]。然后将生物素标记羊抗鼠IgG进行孵育，时间30 min，2～5 min DAB显色，苏木素实现复染以后，脱水并进行透明封片。阳性对照使用迈新公司提供的阳性乳腺癌组织，而阴性对照则使用PBS来代替一抗[5]。
1.3观察指标
1.3.1 检测MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2 通过对两组患者的MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2进行检测，对比观察两组患者的MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2在不同肺组织的表达情况以及在腺癌、鳞癌和腺鳞癌中的不同表达；MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2与临床分期、分化程度以及淋巴结转移的关系。
1.3.2 分析MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达情况 采用半定量方法对MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达情况进行分析，通过计算染色强度以及阳性细胞百分比来判定。染色强度共分为4级，棕褐色为3分，棕黄色为2分，淡黄色为1分，未染色为0分[6]。阳性细胞百分比共分为5级，>75%为4分，50%～75%为3分，25%～50%为2分，5%～25%为1分， 当癌变发生的时候，基质金属蛋白酶及其抑制剂的表达都会出现明显的上调，但是抑制剂的增高程度不能够抑制基质金属蛋白酶的活性，二者间的平衡还是会被打破[15]。通过对肺癌组织中的MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2进行检测，发现不同的组织类型中MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达水平也是不一样的[16]。因为腺癌的转移和侵袭发生比较早，MMP-9的高表达可以实现对肿瘤细胞的浸润，导致发生侵袭的机会比较高，研究显示在研究组患者中MMP-9以及TIMP-1在腺癌的组织中表达明显高于鳞癌（P参考文献]
[1] 梁乃超，万晓年. 基质金属蛋白酶MMP-9、TIMP-1及VEGF的表达情况与非小细胞肺癌组织侵袭的相关性[J]. 昆明医科大学学报，2016，37（10）：67-70.
[2] 祝丽晶，李芹芹，刘强，等. 血清基质金属蛋白酶-9水平在非小细胞肺癌侵袭和转移中的意义[J]. 中华实用诊断与治疗杂志， 2017，4（2）：165-166.
[3] Wang G，Tian W，Liu Y，et al. Visfatin triggers the cell motility of non-small cell lung cancer via up-regulation of matrix metalloproteinases[J].Basic & Clinical Pharmacology & Toxicology，2016，119（6）：548-554.
[4] 李海丽，王轶楠，肖建波，等. 培美曲塞联合铂类化疗对晚期非小细胞肺癌患者外周血 TGF-β1、MMP2的影响[J]. 现代肿瘤医学，2015，2（3）：3439-3442.
[5] 钟海辉，刘汉云，梁锦崧，等.围手术期联合药物化疗对非小细胞肺癌患者血清基质金属蛋白酶-9金属蛋白酶组织抑制剂血管内皮生长因子水平的影响[J].山西医药杂志，2016，45（13）：1537-1539.
[6] Wan Z，Jiang D，Chen S，et al. T-box transcription factor brachyury promotes tumor cell invasion and metastasis in non-small cell lung cancer via upregulation of matrix metalloproteinase 12[J]. Oncology Reports，2016， 36（1）：306.
[7] 王志维，牛玉旭，林辉. 趋化因子受体9、血管内皮生长因子及基质金属蛋白酶2、9在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义[J]. 广西医学，2016，38（10）：1377-1380.
[8] 余雪君，刘欣艳，李彩荣，等. 血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶抑制因子-2在非小细胞肺癌中的表达及意义[J].中国医药导报，2017，14（8）：107-110.
[9] 赵莹莹，钟根深，袁晓梅，等. 非小细胞肺癌组织中基质金属蛋白酶-3的表达与患者预后的关系[J].新乡医学院学报，2016，33（5）：379-383.
[10] Ma L，Wang R，Nan Y，et al. Phloretin exhibits an anticancer effect and enhances the anticancer ability of cisplatin on non-small cell lung cancer cell lines by regulating expression of apoptotic pathways and matrix metalloproteinases[J]. International Journal of Oncology，2016， 48（2）：843.
[11] 孙希. MMP-7在非小细胞肺癌中的研究进展[J]. 实用肿瘤学杂志， 2016， 30（1）：93-96.
[12] 王鑫，邢国宏.核心蛋白聚糖、基质金属蛋白酶-2在非小细胞肺癌的表达及其与临床特征的关系[J].临床内科杂志，2015，32（1）：20-22.
[13] 梁乃超. MMP-9和VEGF在非小细胞肺癌患者中的表达情况[J]. 医学综述，2017，23（9）：1867-1869.
[14] H？?]stbacka J，Fredén F，Hult M，et al. Matrix metalloproteinases-8 and-9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in burn patients. A prospective observational study[J]. Plos One，2015，10（5）：e0125918.
[15] 房新建，??磊，蒋华，等. CD44st和MMP-2在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义[J]. 江苏医药，2015，41（24）：2961-2963.
[16] 方利洲，刘凌，张剑青，等.吉非替尼对中、晚期非小细胞肺癌患者血清MMP-7、MMP-9表达的影响[J]. 基因组学与应用生物学，2016，35（11）：2909-2915.
[17] Chang YL，Shim HS，Lee S，et al. Prognostic effect of matrix metalloproteinase-9 in patients with resected non small cell lung cancer[J].Journal of Cardiothoracic Surgery，2015，10（1）：1-8.
[18] 米丽丽，杨大运，顾潇，等. E-cadherin和MMP-2在非小细胞肺癌组织中的表达及相关性[J]. 河北医药，2015，1（7）：2569-2571.
[19] 夏彦东，常延河，杨宏秀，等. HPA和MMP9对非小细胞肺癌患者临床预后评价的意义研究[J].临床肺科杂志，2015，1（12）：2148-2152.
[20] 覃玲艳，王华新，郭凌川，等. CD147、EGFR和HIF-1α在非小细胞肺癌中的表达及意义[J]. 江苏医药，2016， 42（4）：423-427.
（收稿日期：2017-08-17）
发表于 2018-8-16 19:50:30