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病理常规制片技术是病理诊断的基础。切片质量是指导医师作出准确诊断的重要保证。在制片时，会遇到许多问题，如切片时出现裂痕、皱褶、破碎；染色过深或过浅等。特别是淋巴结组织，由于淋巴结组织细胞成分丰富，间质少，外周有一层较致密的结缔组织被膜【sup】［1］【/sup】，这样的结构特征决定了淋巴组织的常规制片必须遵循“薄切、淡染”的原则。笔者通过摸索和实践，针对淋巴结组织制片时出现这些的常见问题的原因加以分析，总结出了一些经验和体会。
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首先对组织切片产生裂隙的原因经行实验分析
材料：本院手术切除的淋巴结样本30例，取材厚度均为0.2～0.3cm，厚薄均匀，采用ZT-12P全自动脱水机进行固定、脱水、透明、浸蜡、包埋机包埋。采用手工染色，主要试剂：Baso苏木素-伊红染液、0.5%盐酸乙醇分化液。
方法：将30例样本每个样本分别制成两个蜡块，然后均分为A、B两组；A组30例蜡块常规置于冷台冷却后，按报道【sup】［2］【/sup】直接切片厚度为3μm。B组30例蜡块置于冷台冷却后，将蜡块修到最大面时用拇指捂5～6秒再切片，厚度为3μm。A、B两组切片展片时水温均控制在40℃左右即可，过高小皱褶打不开；过低则切片不平坦、贴片不牢易脱片；最后同时染色。
结果：B组切片效果较好、片子完整、结构完好，镜下组织无裂隙、且连片。
染色时间的实验分析
将B组每个蜡块分别切3张，然后均分为①②③3组用新鲜苏木素分别进行5、8、10分钟染色，用0.5%盐酸乙醇分化15秒。伊红染色30秒。常规脱水、透明、封固。
苏木素染色5分钟的①组染色效果最好，颜色鲜艳，均匀，胞核、胞质清晰，这与报道的一致【sup】［3］【/sup】。
讨 论
在淋巴组织疾病的研究中，石蜡切片，HE染色仍是临床病理诊断中最为实用、简便的方法。为了减少或纠正组织切片的裂隙、和解决染色效果不佳的问题，提如下建议。
组织处理时，标本取材0.2～0.3cm为宜，厚薄要均匀；最好选用4%中性缓冲甲醛液作为常规组织固定液，并且适当延长固定时间。
切片时，拧固刀座，夹紧刀片，防止因机械部分松动而出现切片裂隙，蜡块冷冻后不易立即切片，应将蜡块修到最大面后用拇指捂4～5秒后切片。
裱片时水温以40℃左右为宜，以免因水温过高，造成切片扩散，形成人为裂隙。
染色时间比常规HE染色、苏木素染色的时间约缩短了一半。大约为5分钟。此时制出的淋巴组织切片平整，结构完好，镜下观察裂隙明显减少或消除，组织细胞核浆对比明显，色彩鲜艳，在高倍镜下可以清晰地观察核膜、核仁和染色质等细微结构。这样能够获得更优良的HE染色切片，从而为临床病理诊断医师做出准确的诊断提供重要保障。
参考文献
1 王德田,罗玉凤,曹金伶,等.如何制作精良的淋巴结组织切片［J］.诊断病理学杂志,2005,12（4）:314.
2 康源,刘卫平.淋巴结常规制片技术体会［J］.临床与实验病理学杂志,2008,24（2）:235-236.
3 姜冰,杨军,彭长缨.淋巴结片子染色中苏木精染色时间的探讨［J］.诊断病理学杂志,2010,17（3）:238. |
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发表于 2018-8-16 12:19:12