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2018维药欧芹根治疗大鼠肝损伤有效成分的筛选
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发表于 2018-8-14 17:46:52
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【摘要】 目的 观察芹菜根8个流分对四氯化碳(CCl4)诱导急性肝损伤大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平的影响, 筛选出有效成分。方法 110只小鼠, 随机分为模型组、8个流分组、阳性对照组、空白对照组, 共11组, 每组10只。空白对照组和模型组预先灌胃生理盐水0.2 ml/10 g;芹菜根各流分组分别预先灌胃各提取部位50 mg/kg;阳性对照组预先灌胃150 mg/kg联苯双酯;以上各组均灌胃1次/d, 连续10 d, 所有动物第10天给药1 h后, 除空白对照组腹腔注射等量生理盐水外, 其他各组用四氯化碳(1 ml/kg)腹腔注射。小鼠20 h后眼球取血, 离心, 分离血清, 分别测定ALT、AST。
/6/view-10687756.htm
结果 模型组ALT和AST水平均明显高于空白对照组, 差异均具有统计学意义(P医药股份有限公司新昌制药厂);四氯化碳(新疆医科大学分析测试中心, 分析纯)。
1. 3 方法
1. 3. 1 芹菜根各流分提取 将10 kg维药芹菜根用30%、50%、70%、95%乙醇回流提取2次, 1 h/次, 合并各乙醇液后减压浓缩, 得干浸膏2731 g。将所得干浸膏用水混悬, 依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取, 减压浓缩后冷冻干燥, 得石油醚干膏384 g、氯仿干膏454.32 g、乙酸乙酯干膏397.92 g、正丁醇干膏532.8 g备用。由于前期实验显示乙酸乙酯、正丁醇部位是其有效部位, 因此直接应用乙酸乙酯、正丁醇干膏。
取上述剩余乙酸乙酯部位浸膏约170 g, 正丁醇部位浸膏约420 g。
?⑺?得乙酸乙酯部位浸膏170 g, 与硅胶拌样, 湿法装柱, 以石油醚-乙酸乙酯(10:0-0:1)进行梯度洗脱, 按等体积
(250 ml)收集流分, 根据薄层色谱结果合并相同流分, 得3个流分, 分别约为20、14、11 mg。
将所得正丁醇部位浸膏420 g, 用大孔吸附树脂柱色谱法分离, 用水-乙醇梯度洗脱, 按等体积(250 ml)收集流分, 得到10%、30%、50%、70%、95%组分, 根据薄层色谱结果合并相同流分, 得5个流分, 分别为30、21、17、12、10 mg。
1. 3. 2 实验动物干预方法 空白对照组和模型组预先灌胃生理盐水0.2 ml/10 g;芹菜根各流分组分别预先灌胃各提取部位50 mg/kg;阳性对照组预先灌胃150 mg/kg联苯双酯;以上各组均灌胃1次/d, 连续10 d, 所有动物第10天给药1 h后, 除空白对照组腹腔注射等量生理盐水外, 其他各组用四氯化碳(1 ml/kg)腹腔注射。小鼠20 h后眼球取血, 离心
(3000 r/min), 分离血清, 分别测定ALT、AST。
1. 4 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件对研究数据进行分析处理。计量资料以均数±标准差( x-±s)表示, 采用t检验。P参考文献
[1] 陈妍, 乌莉娅?沙依提, 马亮英. 新疆维药欧芹根总黄酮的乙醇提取工艺优选及其大孔树脂筛选. 中国实验方剂学杂志, 2014, 20(15):19-21.
[2] 乌莉娅?沙依提, 陈妍. 芹菜根提取物对CCl4所致急性小鼠肝损伤的保护作用. 华西药学杂志, 2008, 23(4):411-412.
[3] 陈妍, 刘军, 林伊梅, 等. 芹菜根提取物对D-氨基半乳糖所致急性肝损伤的保护作用研究. 中国药房, 2011(35):3272-3274.
[4] 乌莉娅?沙依提, 陈妍, 耿萍, 等.维药芹菜根化学成分的研究.中药材, 2007(12):1535-1536.
[5] 陈妍, 缪娟, 高宏. 欧芹根对非酒精性脂肪肝大鼠的有效成分及机制研究. 陕西医学杂志, 2016, 45(9):1112-1113.
[6] 谢婧雯, 陈妍, 贾蔓菁, 等. 欧芹根总黄酮对非酒精性脂肪性肝病大鼠的治疗作用及机制研究. 中国药业, 2016, 25(20):29- 32.
[收稿日期:2017-12-13]
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