2018普奈洛尔抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞生长机制的实验研究

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　　[摘要]目的：探讨普奈洛尔抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞生长的机制。方法：选择本院瘢痕疙瘩患者病理组织，分离培养，获取成纤维细胞，并分别于含有普萘洛尔的培养基（实验组）和单纯培养基（对照组）中进行培养，应用CCK-8法检测两组瘢痕疙瘩成纤维细胞生长曲线，酶标仪检测450-630nm的吸光度值。结果：实验组瘢痕疙瘩成纤维细胞生长能力明显受到抑制，且吸光度值明显低于对照组，差异有统计学意义（P /6/view-10121428.htm
　　[关键词]瘢痕疙瘩；成纤维细胞；普萘洛尔；生长曲线
　　[中图分类号]R619+.6 [文献标志码]A [文章编号]1008-6455（2018）02-0091-03
　　瘢痕疙瘩常继发于皮肤伤口的不良愈合，不仅影响美观，常可伴发局部感觉异常，严重者甚至可形成局部破溃，严重影响患者身心健康。普萘洛尔常用于整形外科中血管瘤的治疗，其在抑制血管瘤侵袭性生长方面，疗效显著。基于此，DE Mesquita CJ曾大胆假设将普萘洛尔应用于瘢痕疙瘩的治疗，并做了大量的临床实验。本研究主要从普萘洛尔对瘢痕疙瘩的生物学特性方面出发，明确其影响瘢痕组织成纤维细胞生长的作用机制，现报道如下。
　　1材料和方法
　　1.1实验药品及试剂：盐酸普萘洛尔片（东北制药生产，批准文号：国药准字HP1021682），PBS液，0.075%Ⅱ型胶原酶，10%FBS，低糖DMEM，胎牛血清，DMEM培养基，青链霉素，0.25%胰蛋白酶，二甲基亚砜（DMSO）溶液，PBS溶液。
　　1.2瘢痕疙瘩组织：瘢痕疙瘩组织来源于本院整形外科瘢痕疙瘩切除患者，并经病理证实，且所有患者对本研究知情并签署相关知情同意书。纳入标准：①患者6个月内病变组织无破溃、感染及癌变等；②患者6个月内未口服抗瘢痕药物或激素类药物；③患者6个月内未接受放射治疗；④无精神性疾病及相关器质性疾病者。
　　2方法
　　2.1瘢痕疙瘩成纤维细胞的制备：用PBS液冲洗所获取的脂肪组织，用Ⅱ型胶原酶消化获取脂肪颗粒，过滤上清液及未消化的脂肪组织，并放入离心机中以1200r/min离心10min，得到单核细胞，调整细胞浓度至104个细胞/ml，进行培养，获取所取种子细胞，并进行免疫鉴定。
　　2.2实验分组：根据培养基不同，将实验分为2组，实验组为含有50ng/L普萘洛尔的培养基；对照组为单纯培养基。将获取的瘢痕疙瘩成纤维细胞分别放入两组培养基中进行培养，48h后，两组培养基中分别加入10ul的CCK-8液，继续培养24h。
　　2.3检测指标：使用酶标仪检测两组瘢痕疙瘩成纤维细胞生长因子450～630nm的吸光度值，吸光度值越高，表明瘢痕成纤维细胞增殖能力越强；并连续检测其7d生长曲线，从而明确普萘洛尔对瘢痕疙瘩成纤维细胞生长能力的影响。
　　2.4统计学分析：数据采用SPSS 18.0统计软件进行分析。采用LSD-t检验进行两两比较，P